0512-63061203
慢病毒載體（Lentivirus vectors）的特性：在非分裂和分裂細胞中穩定整合、轉基因的長期表達、低免疫原性，使其成為基因治療的理想基因轉移載體。轉基因可以在非分裂或終末分化的非常靜止的細胞（例如神經元）中實現。我們的慢病毒載體來源于HIV-1病毒，序列經過精心優化，提高了生物安全性、基因表達水平和病毒轉導效率。慢病毒顆粒通常是在包裝細胞中共表達病毒體包裝元件和載體基因組來產生的。我們開發出了一系列專有技術和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面提升了慢病毒包裝工藝水平。
| 目錄號 | 產品信息 | 規格 | 滴度 | 價格（CNY） | 生產時間 |
|---|---|---|---|---|---|
| H101 | 干擾慢病毒（一個干擾病毒） | 1ml | 1*108TU/ML | ￥2999 | 15個工作日 |
| H102 | 干擾慢病毒套餐（三個干擾病毒一個陰性對照） | 4*1ml | 1*108TU/ML | ￥7880 | 20個工作日 |
| H103 | 過表達慢病毒2000bp以下 | 1ml | 1*108TU/ML | 基因長度*￥1+￥3880 | 咨詢 |
| H104 | 過表達慢病毒4000bp以下 | 1ml | 1*108TU/ML | 基因長度*￥1.2+￥3999 | 咨詢 |
| H105 | 慢病毒陰性對照 | 1ml | 1*108TU/ML | ￥1500 | 10個工作日 |
| 生產規格 | 非純化慢病毒制備服務 | 純化慢病毒制備服務 |
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| 交付內容 |
定制病毒，按照規格交付：
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定制病毒，按照規格交付：
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對照病毒，按照定制病毒的規格對應贈送：
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對照病毒，按照定制病毒的規格對應選購：
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聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈送 |
聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈送 |
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輔助病毒，按照定制病毒的規格對應選購：
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輔助病毒，按照定制病毒的規格對應選購：
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| 病毒重懸液 | 慢病毒專用儲存液 | 慢病毒專用儲存液 |
| 運輸/存儲 | 干冰/-80°C，避免反復凍融 | 干冰/-80°C，避免反復凍融 |
| 推薦應用 | 體外培養細胞轉導 | 體外培養細胞轉導、動物體內細胞轉導 |
為了更好地開展您的實驗，我們按照“對照病毒與定制病毒的生物學應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對照病毒表達熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA，則對照病毒表達一個Scramble shRNA。推薦的對照病毒信息如下表所示：
| 對照病毒 | 對照載體名稱 | 對照載體ID | 定制病毒 |
|---|---|---|---|
EGFP對照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性 |
pLV[Exp]-EGFP:T2A:Puro-EF1A>mCherry |
VB010000-9298rtf | 哺乳動物基因表達慢病毒（包含Tet-On誘導表達和FLEX條件性表達）、哺乳動物CRISPR慢病毒、哺乳動物非編碼RNA表達慢病毒 |
Scramble shRNA對照慢病毒，EGFP熒光，Puro抗性 |
pLV[shRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_shRNA |
VB010000-0009mxc | 哺乳動物shRNA干擾慢病毒 |
Scramble miR30-shRNA對照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性 |
pLV[miR30]-EGFP/Puro-EF1A>mCherry:Scramble_miR30-shRNA |
VB010000-9387zjj | 哺乳動物miR30-shRNA干擾慢病毒 |
Scramble msgRNA對照慢病毒，EGFP熒光，Puro抗性 |
pLV[msgRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_gRNA |
VB010000-9298rtf | 哺乳動物msgRNA表達慢病毒（dCas9-SAM系統元件之一） |
TRE-mCherry對照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性（選購） |
pLV[TetOn]-EGFP/Puro-TRE>mCherry |
VB180820-1492jrb | 哺乳動物基因Tet-On誘導表達TRE慢病毒 |
FLEX-mCherry對照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性（選購） |
pLV[FLEXon]-EGFP/Puro-EF1A>LL:rev(mCherry):rev(LL) |
VB010000-9324qqg | 哺乳動物基因FLEX條件性表達慢病毒 |
為了更好地開展您的實驗，我們按照“輔助病毒與定制病毒的生物學應用相匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如，如果定制病毒是一個只含TRE啟動子的TetOn慢病毒，則需要一個表達rtTA的輔助病毒，才能進行誘導表達實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示：
| 對照病毒 | 對照載體名稱 | 對照載體ID | 定制病毒 |
|---|---|---|---|
Cas9慢病毒，Hygro抗性（選購） |
pLV[Exp]-CBh>hCas9/Hygro |
VB010000-9380sne | 哺乳動物gRNA慢病毒（不含Cas9） |
MS2/P65/HSF1慢病毒（dCas9-SAM系統元件之一），Hygro抗性（選購） |
pLV[Exp]-EF1A>MS2/P65/HSF1/Hygro |
VB010000-9383ffr | 哺乳動物msgRNA表達慢病毒（dCas9-SAM系統元件之一） |
dCas9/VP64慢病毒（dCas9-SAM系統元件之一），Bsd抗性（選購） |
pLV[Exp]-EF1A>dCas9/VP64/Bsd |
VB010000-9384wwc | 哺乳動物msgRNA表達慢病毒（dCas9-SAM系統元件之一） |
Cre慢病毒，Hygro抗性（選購） |
pLV[Exp]-CMV>Cre/Hygro |
VB010000-9372bck | 哺乳動物基因FLEX條件性表達慢病毒 |
tTS/rtTA慢病毒，Hygro抗性（選購） |
pLV[Exp]-CMV>tTS/rtTA/Hygro |
VB010000-9369xhm | 哺乳動物基因Tet-On誘導表達TRE慢病毒 |
| 步驟 | 描述 | 時間 |
|---|---|---|
 Co-transfection |
我們常規使用的第三代慢病毒包裝系統包括1個轉移質粒（Transfer plasmid）、1個膜蛋白表達質粒（Envelope plasmid）、2個包裝質粒（Packaging plasmids），將這些質粒共轉染包裝細胞。2個包裝質粒分別為Gag/Pol表達質粒和Rev表達質粒。 | 第1天 |
 Supernatant collection |
在細胞里，轉移質粒轉錄出攜帶目的基因（Gene of Interest，簡稱GOI）的HIV RNA基因組，與包裝質粒表達出的衣殼結構蛋白、酶、調控蛋白組裝成病毒顆粒后，轉運到細胞膜內側，形成包膜病毒分泌到胞外。膜蛋白質粒表達的VSV-G膜蛋白錨定在細胞膜上，隨著病毒成熟，與細胞膜一起成為了病毒的膜。細胞短暫孵育后，收集上清，離心去除細胞碎片并過濾。 | 第3天 |
 Concentration and purification |
PEG濃縮病毒顆粒。對于超純化慢病毒（體內應用級別），采用蔗糖離心方法進一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
 Quality Control |
對病毒進行滴度測定（Titer determination）、微生物檢測（Bioburden test，針對細菌、真菌）、支原體檢測（Mycoplasma test）等。 若轉移載體同時編碼一個熒光蛋白，我們還會將病毒進行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況（Transduction test）。此外，對于超純化慢病毒，我們還可以檢測內毒素水平（Endotoxin test）。 |
第5天及以后 |
注意： 第三代慢病毒包裝系統只能包裝第三代的慢病毒轉移載體。但是第二代慢病毒包裝系統既能包裝第二代，也能包裝第三代的慢病毒轉移載體。第三代慢病毒轉移載體上的5’ LTR中的U3元件是被一個外源啟動子替代（如CMV啟動子或者RSV啟動子），使其不依賴Tat蛋白進行HIV RNA基因組的轉錄，故第三代慢病毒包裝系統的包裝質粒不含Tat蛋白。第二代慢病毒轉移載體上的5’ LTR是野生型的LTR，含有U3、R和U5元件，依賴Tat蛋白轉錄HIV RNA基因組，故第二代慢病毒包裝系統的包裝質粒含有Tat蛋白。
我們的滴度保證僅適用于這樣的轉移載體
對于如下這樣的轉移載體，我們不能保證滴度：
交付周期是指訂單接收到發貨之間的時間，不包括需要客戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時間。對于不含有熒光標記，但是含有藥篩標記的病毒載體，如果您需要獲得細胞藥篩效果的質檢結果，由于細胞生長狀態需要較長時間觀察，周期將額外增加15-20天。
如需客戶提供慢病毒載體，則請按照外來物品接收指南將載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進行裝運以免造成物品的任何延誤和損壞。客戶提供的所有材料均需經過QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，客戶提供物品接收并通過QC之后生產才正式開始。
